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細胞支原體污染PCR檢測試劑盒
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相關(guān)文章品牌 | SouthernBiotech | 貨號 | 13100-01 |
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供貨周期 | 一個月 |
產(chǎn)品特點:
用于特異性檢測細胞培養(yǎng)液中支原體的污染
用于擴增支原體基因組中16S rRNA編碼區(qū)
特殊的引物設(shè)計擴增用于覆蓋支原體的三大類(Mycoplasma,Acholeplasma and Ureaplasma),因此可檢測超過95%的潛在的細胞污染。
檢測方法簡單,3小時內(nèi)出結(jié)果。
檢測靈敏度高:可檢測到100ul細胞上清液中2-5毫微微克的支原體DNA。
特異性高,只擴增細胞培養(yǎng)液中支原體DNA,而真核細胞和細菌的DNA被擴增。
試劑盒帶有陽性對照用于驗證PCR體系的穩(wěn)定性。
試劑盒內(nèi)帶有內(nèi)參對照,用于排除PCR抑制劑引起的假陰性。
試劑盒用于擴增的支原體種屬及對應(yīng)PCR產(chǎn)物對照片段
支原體種屬 PCR產(chǎn)物片段(bp)
A.laidlawii 611
M.arginini 448
M.arthritidis 486
M.bovis 605
M.cloacale 459
M.falconis 458
M.faucium 479
M.fermentans 579
M.genitalium 464
M.hominis 448
M.hyorhinis 525
M.hyosynoviae 471
M.opalescents 573
M.orale 503
M.pirum 533
M.pneumonia 493
M.salivarium 482
M.synoviae 572
U.urealyticum 558
結(jié)果分析:
細胞如被支原體污染,可擴增到448-611bp一條或多個條帶
樣本中包含內(nèi)參的DNA將會擴增出270bp的PCR片段(見圖,泳道7),該擴增表明實驗系統(tǒng)可靠性。
如在一些樣品中擴增不到內(nèi)參(270bp),這種情況下可設(shè)置陰性對照(樣本為水),可擴增到270bp的條帶。
如果樣品中含有PCR的抑制劑,可通過DNA提取去除。
如果細胞發(fā)生嚴重的支原體污染,448-611bp擴增產(chǎn)物將聚集或270bp的內(nèi)參將消除(見圖,泳道6)
低于100bp的低濃度片段,表明是二聚體或非特異性片段,而非陽性結(jié)果,這種情況不影響檢測結(jié)果的精度。