技術文章
Technical articlesChondrexTM ELISA封閉/樣本稀釋液
背景簡介:
ELISA實驗廣泛應用于抗體檢測,這些實驗中沒有考慮樣本中蛋白與ELISA板表面結合引起的假陽性。在這些非特性反應中,檢測抗體的空白值被所有客戶考慮到,但是樣本本身的空白值常備客戶忽略。背景反應依賴于樣本本身。如果不考慮樣本的背景反應,背景反應值也會計入讀數(shù),出現(xiàn)很多不確定的結果。因此必須認識到ELISA實驗中各種假陽性以得到真實的數(shù)據(jù)。
對于抗原包被的試劑盒,低稀釋比的血清,其背景值會很高,會超出抗原-抗體反應。通過設置無抗原包被孔 (None),很容易測定背景效應。
注:降低試劑盒靈敏度并不能降低低背景反應。
Chondrex公司研制的封閉液(ChonBlock™),能夠有效阻止抗體檢測試劑盒中的非特異性反應,不影響試劑盒本身的抗原抗體反應。該封閉液被廣泛用于抗體檢測試劑盒,例如:人或動物血清致病因子,疫苗及自身免疫疾病研究檢測等。
關節(jié)炎病人血清樣本(1/10~1/640)用不同的封閉液稀釋稀釋,加入檢測板,用抗人IgG-HRP標記抗體檢測結果對比,結果顯示ChonBlock™能夠有效封閉背景效應,而其他緩沖液系統(tǒng)都達不到以上效果。
13例正常人血清樣本和13例關節(jié)炎血清樣本1/500用以下稀釋液稀釋稀釋。a)RIA-10% NGS b)ChonBlock™封閉液,加入到Glycine對照多肽,CCP孔。CCP孔真實的OD值檢測值:減去背景OD值(Glycine對照孔)。
注:RIA-10% NGS緩沖液系統(tǒng),由于背景效應太高,測不到抗CCP抗體。
產品訂購:
中文名稱 | 英文名稱 | 貨號 | 規(guī)格 |
封閉/樣本稀釋液 | Blocking/Sample/Dilution Buffer | 9068 | 100ml |
檢測抗體稀釋液 | Detection Antibody Dilution Buffer | 90681 | 100ml |
參考文獻
1. Terato et al. Preventing intense false positive and negative reactions attributed to the principle of ELISA to reinvestigate antibody studies in autoimmune diseases. J. Immunol. Methods 407, 15-25 (2014).
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